陕西依科生物技术服务有限公司是一家专业提供病理诊断服务的独立医学检验所,主要包括西宁病理技术服务、西宁HE染色、西宁石蜡包埋、病理切片扫描等,其中以分子病理为基础的精准服务是本公司特色、以数字病理为纽带的多学科综合诊疗服务是本公司的优势。 咨询热线:13572593771

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西宁免疫荧光检测间接法的相关步骤

发布日期:2019-12-18 9:44:00来源:http://xn.sxyksw.com/news295232.html

详细介绍

陕西依科生物技术服务有限公司是一家专业提供病理诊断服务的独立医学检验所,主要包括西宁病理技术服务、西宁HE染色、西宁石蜡包埋、病理切片扫描等,其中以分子病理为基础的精准服务是本公司特色、以数字病理为纽带的多学科综合诊疗服务是本公司的优势。

  免疫荧光检测是我公司重点服务项目之一,相比传统的检测方法免疫荧光检查是将荧光素与抗体连接成荧光抗体,再与待检标本中的抗原反应,将反应物置荧光显微镜下观察抗原抗体复合物散发的荧光,借此对标本中的抗原进行鉴定和定位。免疫荧光检查可分直接法、间接法、夹心法和补体法。今天我们来介绍一下免疫荧光间接法的相关步骤:

如检查未知抗原,先用已知未标记的特异抗体(第1抗体)与抗原标本进行反应,用水洗去未反应的抗体,再用标记的抗抗体(第2抗体)与抗原标本反应,使之形成抗原—抗体—抗体复合物,再用水洗去未反应的标记抗体,干燥、封片后镜检。如果检查未知抗体,则表明抗原标本是已知的,待检血清为第1抗体,其它步骤的抗原检查相同。

(1)免疫荧光检测首先滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于已知抗原标本片,10分钟后弃去,使标本片保持一定湿度。

(2)滴加以0.01mol/L,pH7.4的PBS适当稀释的待检抗体标本,覆盖已知抗原标本片。将玻片置于有盖搪瓷盒内,37℃保温30分钟。

(3)取出玻片,置于玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗1~2次,然后按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸5分钟,不时振荡。

(4)取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,滴加一滴一定稀释度的荧光标记的抗人球西宁蛋白抗体。

(5)将玻片平放在有盖搪瓷盒内,37℃保温30分钟。

(6)重复操作步骤(3)。

(7)取出玻片,用滤纸吸去多余水分,滴加一滴缓冲甘油,再覆以盖玻片。

(8)荧光显微镜高倍视野下观察,结果判定同直接法。

以上就是免疫荧光间接法的相关实验步骤,如有其它疑问欢迎来电咨询我们。

陕西依科生物技术服务有限公司尊重以人为本,提倡绿色医疗。致力于西宁病理技术服务、西宁HE染色、西宁石蜡包埋等科研领域,力争在未来发展成国内一流的专业病理和分子诊断服务的研发机构!